自考农业生物技术概论07290复习资料（5）

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1.原生质体：除细胞壁以外细胞膜包被的物质。

2.原生质体的特性：（1）去壁的原生质体容易实现外源遗传物质的导入和吸收（2）不同来源的原生质体具有彼此融合的能力（3）原生质体具有细胞全能性。

3.原生质体分离的方法：机械分离法、酶解分离法（纯化的方法为漂浮法、界面法）

4.原生质体融合的方法：NaNO3处理、高PH/高浓度钙处理、PEG处理、电融合

5.原生质体融合的类型：自发融合、诱发融合、化学诱导融合。

6.体细胞杂交的应用：培育新品种、合成新材料

1.植物基因的结构：分为转录区（起始密码子、外显子、内含子、终止密码子、3’端非编码区、5’端非翻译区）和非转录区（启动子、终止子、增强子）

2.载体分为质粒载体、噬菌体载体、黏粒载体、人工染色体载体四种。

3.质粒：是一种广泛存在于细菌细胞中染色体以外能够自主复制的裸露的环状DNA分子。

4.质粒载体的特征：（1）能在宿主细胞中独立复制和表达（2）具有1-2个选择标记（3）具备多克隆位点（4）自身相对分子量小、拷贝数高（5）易于操作和DNA的制备。

5.限制性内切酶：是一类能够识别双链DNA分子中某种特定的核苷酸序列，并能精确特异的切割双链DNA分子的核酸内切酶。

6.限制性内切酶的命名：EcoR I属名（第一个字母大写）+种名（前两个字母小写）+菌株类型（大写）+（罗马字母表示发现的顺序）

7.DNA连接酶：连接DNA末端的酶，T4DNA

2.分子标记：在分子水平上可标识的遗传多样性。

3.分子标记的分类：（1）基于DNA-DNA杂交：RFLP（2）基于PCR：ISSR SSR STS SCAR ARAP（3）基于PCR和RE酶切：AFLP（4）基于DNA测序：SNP EST

4.应用最普遍的是RFLP RAPD SSR（共显性）AFLR

5.PCR反应组分：DNA模板、一对引物、dNTP、Taq酶、Mg2+、缓冲液、ddH2O

6.常用的显色剂：琼脂糖凝胶—EB染色

聚丙烯酰胺凝胶—硝酸银染色

带荧光分子的引物—荧光捕获